Conferencias, I Congreso Internacional de Ciencias Naturales y Aplicadas

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Uso de Embriones Partenogenéticos para el Estudio del Estrés en Mamíferos
Ernesto Orozco-Lucero, Bianca Viviana Orozco-Galindo, Melissa Molina-García, Marbella Chávez-Solano, Diana Marcela Beristain-Ruiz, Mateo Fabián Itzá-Ortiz, Armando Varela-Ramírez

Construir: Centro Cultural Universitario
Sala: Teatro Gracia Pasquel
Fecha: 2023-11-29 03:40 PM – 04:00 PM
Última modificación: 2023-11-19

Resumen


La producción in vitro de embriones (PIV) es una tecnología reproductiva ampliamente utilizada. No obstante, las condiciones subóptimas del medio in vitro ocasionan estrés celular, disminuyendo el desarrollo embrionario. El estrés oxidativo (EO) se incrementa en embriones cultivados in vitro. Es necesario conocer las bases moleculares del EO embrionario para mitigarlo suplementando antioxidantes. Para ello, es importante estimar con precisión el tiempo entre la activación ovocitaria y eventos particulares del desarrollo embrionario (timing). La activación partenogenética (AP) consiste en la activación ovocitaria mediante estímulos físicos/químicos, sustituyendo la activación por un espermatozoide, ofreciendo un mejor timing que la fertilización in vitro (FIV). La AP no requiere colectar semen o sacrificar machos. Por tanto, los modelos con embriones partenogenéticos (partenotas) reducen costos, el manejo/uso de animales y las implicaciones bioéticas.

Se establecieron las condiciones de PIV de partenotas bovinas, activadas químicamente, hasta la etapa de blastocisto eclosionado de ocho días de desarrollo (D8). La blastulación alcanzó el 25.02±8.53%. Bajo estas condiciones se exploró el impacto de la modificación del nivel de EO, con la suplementación de agente prooxidante (H2O2) y antioxidante (quercetina), específicamente durante la etapa de segmentación en partenotas bovinas de D4. Se tiñeron las especies reactivas de oxígeno (ERO) de las partenotas. El H2O2 incrementó el nivel de ERO y la quercetina lo disminuyó. Las tasas de partenotas de 5-8 y 10-16 células disminuyeron (P<0.05) tras suplementar H2O2 e incrementaron con la quercetina, demostrando que la modificación del nivel de EO afecta el desarrollo de partenotas bovinas segmentadas.

En cuanto a otras especies, se generaron in vitro partenotas de rata (activación química) hasta la etapa de blastocisto de D5. La suplementación de H2O2 disminuyó el desarrollo embrionario, siendo los resultados: segmentación, 63.37±2.57% (Control), 23.25±13.47% (H2O2), P<0.01; blastulación, 26.42±5.35% (Control), 8.59±4.74% (H2O2), P<0.05. Con ello se demostró nuevamente que el EO afecta el desarrollo partenogenético.

En conclusión, se cuenta con modelos de estudio de EO en partenotas bovinas y murinas hasta la etapa de blastocisto eclosionado, donde el EO afecta el desarrollo de embriones preimplantación. Dichos modelos servirán para futuros estudios sobre estrés celular durante el desarrollo temprano de mamíferos.