Conferencias, I Congreso Internacional de Ciencias Naturales y Aplicadas

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Diseño y construcción de anticuerpos contra el receptor Efrina tirosina cinasa 4 (EphA4).
Jose Oscar Zavala Tapia

Construir: Centro Cultural Universitario
Sala: Sala 1
Fecha: 2023-11-28 02:00 PM – 02:20 PM
Última modificación: 2023-11-19

Resumen


El cáncer es un grave  problema de salud mundial , siendo la primera causa de muerte  alrededor del mundo  con  9.5 millones de defunciones (OMS, 2018).  En México el INEGI reporto esta enfermedad como la tercer causa de muerte después de las enfermedades cardiovasculares y diabetes con 1,122,249 defunciones en el 2021, siendo el cáncer de mama en mujeres y próstata en hombres los que tienen más prevalencia  con 11 y 11.5 casos por 100, 000  habitantes en México. Los adenomas pituitarios (PA) representan el         8 % de todas las neoplasias del sistema nervioso centra (SNC). Datos del análisis de transcriptoma  de adenomas hipofisiarios realizado por Tanaguchi y col 2020, demostró  la sobreexpresión  del receptor efrina tirosina cinasa 4 (Epha4) , el cual pertenece a la familia de receptores  involucrados  en la regulación  de procesos celulares  como adhesión, reconocimiento, división, además de estar directamente relacionado  con cáncer, diabetes, inflamación y enfermedades neurodegenerativas. El  receptor  EphA4  se encuentra sobre expresado  en cáncer hipofisiario, renal, colorrectal , próstata,  gástrico,  y pancreático, observándose  en los procesos metástasis, invasión  y resistencia a quimioterapia y radioterapia. El presente trabajo esta dirigido a la construcción de fragmentos de anticuerpos de cadena sencilla (scFv’s) de  gallina  por desplieguen fago. Para la obtención  de anticuerpos con afinidad se inmunizaran 10 Gallinas utilizando como antígeno  con la región de unión a ligando  (LBD), la  región de ectodominio del receptor ephA4 (ECD), complejos OVA-LBD(EphA4), BSA-LBD(EphA4). A partir del bazo de la Gallina que presente    títulos  altos de respuesta inmune, será extraído el RNA y sintetizado el cDNA para la amplificar las regiones variables de cadena ligera (VL’s) 350 pb y pesada (VH’s) 400 pb, para la obtención de las construcciones de scFv’s (850pb). Los scFv’s serán clonados en el vector  pComb3X, transformados en células de E.coli (XL1-Blue) y desplegados en el fago VCM13 y seleccionados con el antígeno (LBD y ECD). Las construcciones pComb3x-scFv’s serán transformadas en  E.coli TOP10F’ para obtención y expresión  de scFv’s  monoclonales solubles, seleccionando los scFv’s con afinidad y especificidad por el receptor EphA4.