Construir: Centro Cultural Universitario
Sala: Sala 1
Fecha: 2023-11-28 02:00 PM – 02:20 PM
Última modificación: 2023-11-19
Resumen
El cáncer es un grave problema de salud mundial , siendo la primera causa de muerte alrededor del mundo con 9.5 millones de defunciones (OMS, 2018). En México el INEGI reporto esta enfermedad como la tercer causa de muerte después de las enfermedades cardiovasculares y diabetes con 1,122,249 defunciones en el 2021, siendo el cáncer de mama en mujeres y próstata en hombres los que tienen más prevalencia con 11 y 11.5 casos por 100, 000 habitantes en México. Los adenomas pituitarios (PA) representan el 8 % de todas las neoplasias del sistema nervioso centra (SNC). Datos del análisis de transcriptoma de adenomas hipofisiarios realizado por Tanaguchi y col 2020, demostró la sobreexpresión del receptor efrina tirosina cinasa 4 (Epha4) , el cual pertenece a la familia de receptores involucrados en la regulación de procesos celulares como adhesión, reconocimiento, división, además de estar directamente relacionado con cáncer, diabetes, inflamación y enfermedades neurodegenerativas. El receptor EphA4 se encuentra sobre expresado en cáncer hipofisiario, renal, colorrectal , próstata, gástrico, y pancreático, observándose en los procesos metástasis, invasión y resistencia a quimioterapia y radioterapia. El presente trabajo esta dirigido a la construcción de fragmentos de anticuerpos de cadena sencilla (scFv’s) de gallina por desplieguen fago. Para la obtención de anticuerpos con afinidad se inmunizaran 10 Gallinas utilizando como antígeno con la región de unión a ligando (LBD), la región de ectodominio del receptor ephA4 (ECD), complejos OVA-LBD(EphA4), BSA-LBD(EphA4). A partir del bazo de la Gallina que presente títulos altos de respuesta inmune, será extraído el RNA y sintetizado el cDNA para la amplificar las regiones variables de cadena ligera (VL’s) 350 pb y pesada (VH’s) 400 pb, para la obtención de las construcciones de scFv’s (850pb). Los scFv’s serán clonados en el vector pComb3X, transformados en células de E.coli (XL1-Blue) y desplegados en el fago VCM13 y seleccionados con el antígeno (LBD y ECD). Las construcciones pComb3x-scFv’s serán transformadas en E.coli TOP10F’ para obtención y expresión de scFv’s monoclonales solubles, seleccionando los scFv’s con afinidad y especificidad por el receptor EphA4.